Lebensmittelallergene & Pflanzen

Wie funktioniert der PCR-Nachweis von Lebensmittelallergenen?

Beim PCR-Nachweis wird zunächst DNA aus der Lebensmittelprobe, einem Tupfer oder beispielsweise Abspülwasser extrahiert. Anschließend wird mittels real-time PCR untersucht, ob spezifische DNA-Sequenzen des gesuchten Lebensmittelbestandteils vorhanden sind. Das Verfahren ermöglicht einen gezielten molekularbiologischen Nachweis. Es misst jedoch nicht unmittelbar die Konzentration des allergieauslösenden Proteins.

Für welche Lebensmittel eignet sich die PCR-Allergenanalytik?

Die PCR-Allergenanalytik eignet sich für Lebensmittelproben, Flüssigkeiten, Tupfer, Abstriche und Abspüllösungen. Die Eignung hängt unter anderem von der zu untersuchenden Matrix, dem Verarbeitungsgrad, der DNA-Qualität und der Nachweisempfindlichkeit ab. Die konkrete Eignung sollte anhand der Herstellerangaben des jeweiligen Testkits geprüft werden.

Bedeutet ein negatives PCR-Ergebnis, dass ein Lebensmittel frei von Allergenen bzw. allergenen Bestandteilen ist?

Nein. Ein negatives PCR-Ergebnis bedeutet, dass die untersuchte Ziel-DNA unter den Bedingungen des verwendeten Verfahrens und Funktionstüchtigkeit der Kontrollen, nicht nachgewiesen wurde. Es beweist nicht, dass das Lebensmittel vollständig frei von allergenen Proteinen ist. Verarbeitung, DNA-Abbau, Probenzusammensetzung und methodische Grenzen können das Ergebnis beeinflussen.

Welche Lebensmittelallergene lassen sich mit PCR nachweisen?

Mit real-time PCR lassen sich spezifische DNA-Sequenzen zahlreicher allergenhaltiger Lebensmittel nachweisen. Dazu gehören unter anderem Erdnuss, Soja, Sellerie, Senf, Lupine, Sesam, verschiedene Schalenfrüchte, glutenhaltige Getreide, Fisch, Krebstiere und Weichtiere. Welche Allergene untersucht werden können, hängt vom verfügbaren PCR-Test und dessen spezifischen Zielsequenzen ab. CONGEN bietet hierfür die SureFood ^® ALLERGEN-Produktreihe an, welche sowohl qualitative, quantitative, als auch multiplexe Nachweise umfasst.

Welche Allergene kann CONGEN mit real-time PCR analysieren?

CONGEN bietet mit der SureFood ^® ALLERGEN-Produktreihe PCR-Testsysteme für verschiedene Lebensmittelallergene an. Das Sortiment umfasst Einzelnachweise und Multiplex-PCR-Verfahren, einschließlich geeigneter Extraktionsverfahren. Ergänzend besteht die Möglichkeit des Nachweises bestimmter Pflanzen, wie Aprikose, Weichweizen oder beispielsweise Alfalfa. Die SureFood ^® ALLERGEN-Produktreihe umfasst sowohl qualitative, als auch quantitative Analysen.

Können alle 14 kennzeichnungspflichtigen Allergene mit PCR nachgewiesen werden?

Nein, nicht pauschal mit einem einzigen PCR-Test. Die 14 kennzeichnungspflichtigen Allergengruppen nach Anhang II der EU-Lebensmittelinformationsverordnung umfassen unterschiedliche Lebensmittel und Zutaten. PCR eignet sich insbesondere für Zielbestandteile, deren spezifische DNA zuverlässig nachweisbar ist. Für bestimmte Parameter wie Lactose oder Casein, können proteinbasierte Verfahren wie ELISA oder andere validierte Analyseverfahren erforderlich sein.

Welche Nüsse lassen sich mit PCR nachweisen?

Je nach verfügbarem Testsystem können verschiedene Schalenfrüchte und Nüsse in Lebensmittelmatrizes, Tupfern oder Abspülwasser analysiert werden, beispielsweise Haselnuss, Walnuss, Mandel, Cashew, Pistazie, Macadamianuss, Paranuss und Pekannuss. Dies kann sowohl qualitativ als auch quantitativ, einzeln oder in multiplexen Testsystemen erfolgen.

Lassen sich Gluten und glutenhaltiges Getreide mit PCR nachweisen?

PCR-Verfahren können spezifische DNA-Sequenzen von Getreidearten wie Weizen, Roggen, Gerste, Dinkel und Hafer nachweisen. Der Nachweis von glutenhaltigem Getreide, ist nicht mit einer direkten Bestimmung des Glutengehalts gleichzusetzen. Wenn der Glutengehalt eines Lebensmittels bestimmt werden soll, ist ein dafür validiertes Verfahren zur Proteinbestimmung erforderlich.

Können Fisch, Krebstiere und Weichtiere mit PCR nachgewiesen werden?

Ja, für bestimmte Fischarten sowie Krebstiere und Weichtiere sind allergenspezifische DNA-Nachweise möglich. Welche Arten ein Test erfasst, hängt von den spezifischen Zielsequenzen und der Validierung des jeweiligen Testsystems ab.

Was ist eine Multiplex-PCR für Lebensmittelallergene?

Eine Multiplex-PCR ist ein molekularbiologisches Analyseverfahren, mit dem mehrere definierte DNA-Zielsequenzen in einem gemeinsamen Testansatz untersucht werden können. In der Lebensmittelanalytik ermöglicht sie die parallele Untersuchung auf mehrere ausgewählte allergenhaltige Lebensmittelbestandteile. Welche Allergene gleichzeitig nachweisbar sind, hängt vom jeweiligen Multiplex-Testkit ab.

Kann man mit PCR die Menge eines Lebensmittelallergens bestimmen?

Mittels quantitativer PCR kann die Menge einer spezifischen Ziel-DNA bestimmt werden. Daraus lässt sich nicht ohne Weiteres die genaue Konzentration des allergieauslösenden Proteins ableiten. Unter Einsatz von Referenz- und Standardmaterialien, die bestenfalls auf ähnlichen Matrixeigenschaften und Prozessierung beruhen, kann eine Annährung an Proteinmengen erfolgen.

Welche Tupfer eignen sich für die Allergenanalytik?

Für die Probennahme in der Allergenanalytik werden sterile, trockene Viskose- oder Wattestäbchen (ohne Holzstiel) empfohlen. Kurz vor der Probennahme sollten die Tupfer mit destilliertem Wasser angefeuchtet werden, um die entsprechende Fläche abzutupfen. Ein Transportmedium ist nicht notwendig.

Welches PCR-Testkit eignet sich für meine Lebensmittelprobe?

Das passende PCR-Testkit richtet sich nach dem gesuchten allergenen Bestandteilen, der Art der Lebensmittelprobe, der erforderlichen Nachweisempfindlichkeit und dem gewünschten qualitativen oder quantitativen Ergebnis.